Título: AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE ANTIMICROBIANA DE Streptomyces ansochromogenes ISOLADO DE Bysornima crassifolia FRENTE A Pseudomonas aeruginosa.

Autor: ERIKA ALVES DA FONSECA AMORIM

Orientador: RITA DE CASSIA MENDONCA DE MIRANDA

Data da Defesa: 11/09/2020

Resumo:

Este estudo avaliou a ação antimicrobiana de uma bactéria filamentosa isoladas da folha de Byrsonima crassifolia (Murici) frente a microrganismos patogênicos de importância clínica. A bactéria filamentosa endofítica foi identificada em nível de gênero pela técnica clássica e teve a confirmação pela técnica molecular, onde foi possível confirmar o gênero e descobrir a espécie, identificando a bactéria isolada como sendo Streptomyces ansochromogenes. Foi feita uma triagem preliminar através de testes em meio sólido para determinar a ação antimicrobiana de Streptomyces ansochromogenes contra patógenos de relevância médica como Klebsiella pneumoniae ATCC 700603, P. aeruginosa ATCC 0030, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Corynebacterium diphtheriae ATCC 27012, Mycobacterium abscessus massiliense (IC), Cryptococcus gattii ATCC 24065, e Cryptococcus neoformans ATCC 24067, ficando demonstrada a atividade contra bactéria Pseudomonas aeruginosa ATCC 0030 com zonas de diâmetro de inibição (IDZ) de 17,6 ± 0,25 mm. Para a obtenção de metabólito(s) secundários a bactéria endofítica passou por fermentação submersa em meio líquido e a extração do(s) metabólito(s) se deu pelo método líquido-líquido com acetato de etila. Foram feitos ensaios em meio líquido para determinar se o endofítico secretava metabólito ativo para o meio, foram detectados IDZ de 19,6 ± 0,46 mm frente a P. aeruginosa e uma concentração inibitória mínima (CIM) de 500 μg /mL também foi determinada. O metabólito demonstrou ação antibiofilme, sendo observada 100% de inibição da formação de biofilme por P. aeruginosa a uma concentração de 250 μg /mL. Utilizou-se modelo animal alternativo para a determinação da curva de infecção em Tenebrio molitor, observou-se que o metabólito é eficaz na proteção das larvas de Tenebrio molitor. Nos ensaios de citotoxicidade com células PBMC o metabólito também não demonstrou toxicidade para as células eucarióticas. Nos ensaios para determinação de atividade leishmanicida o metabólito apresentou efeito dependente de dose no crescimento da L. amazonensis e obteve o IC50/72 h de 71,65 ± 7,4 μg/mL. Portanto, conclui-se que a bactéria endofitica Streptomyces ansochromogenes é capaz de metabolizar compostos com um potencial promissor para uso futuro como estratégia alternativa no combate a resistência bacteriana.

Palavras-chave:

Endófiticos;, Streptomyces;Metabólitos;Ação antimicrobiana

Abstract:

The objective of this study was to evaluate the antibacterial action of filamentous bacteria isolated from the Byrsonima crassifolia leaf. An endophytic bacterium has been identified by classical and molecular techniques as Streptomyces ansochromogene. Screening for antibacterial action against pathogens with medical relevance (Klebsiella pneumoniae ATCC 700603, Pseudomonas aeruginosa ATCC 15692, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Corynebacterium diphtheriae ATCC 27012,

Mycobacterium abscessus, Cryptococcus gattii ATCC 24065, and Cryptococcus neoformans ATCC 24067) demonstrated activity against the bacterium P. aeruginosa ATCC 0030 with inhibition diameter zones (IDZ) of 17.6 ± 0.25 mm in the preliminary screening in solid medium. After fermentation in liquid medium, an IDZ of 19.6 ± 0.46 mm and a minimum inhibitory concentration (MIC) of 0.5 mg/mL were detected. The antibiofilm action was observed with 100% inhibition of biofilm formation at a concentration of 0.250 mg/mL. When the infection curve was prepared, it was observed that the metabolite was effective in protecting the larvae of Tenebrio molitor. The metabolite does not show toxicity for eukaryotic cells. The leishmanicidal activity demonstrated that the metabolite presented a dose-dependent effect on the promastigotes forms of Leishmania amazonensis growth and the estimated IC50/72 h was 71.65 ± 7.4 μg/mL. Therefore, it can be concluded that the metabolite produced by the endophytic bacterium Streptomyces sp. is promising for future use as an alternative strategy against bacterial resistance.

Keywords: actinomycetes; biotechnological potential; endophytes;endophytic; metabolites; resistance

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